方法名稱： 烏靈膠囊—多糖的測定—分光光度法

應用范圍： 本方法采用分光光度法測定烏靈膠囊中多糖（以葡萄糖計算）的含量。

本方法適用于中成藥烏靈膠囊。

方法原理： 供試品經0.1%十二烷基磺酸鈉溶液加熱回流，提取液用乙醇沉淀后，離心，將水溶液制成供試液，與苯酚及硫酸反應后置于分光光度計，于波長490nm處測定吸收度，按無水葡萄糖計算其含量。

試劑： 1. 乙醇

2. 苯酚

3. 0.1%十二烷基磺酸鈉溶液

儀器設備： 可見分光光度計

試樣制備： 1. 對照品溶液的制備

精密稱取無水葡萄糖對照品，加水制成每1mL含無水葡萄糖0.1mg的溶液。

2. 供試品溶液的制備

取裝量差異項下的本品內容物，研細，取1g，精密稱定，置圓底燒瓶中，精密加入0.1%十二烷基磺酸鈉溶液30mL，精密稱定，加熱回流2小時，立即冷卻，再稱定重量，以水補足減失的重量，搖勻，立即離心（每分鐘3500轉），精密量取上清液10 mL，加乙醇30 mL ，搖勻，冷藏24小時，離心，棄去上清液，沉淀用少量乙醇洗滌，棄去洗滌液，加水適量使溶解，轉移至100mL量瓶中，加水至刻度，混勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

注：“水分測定”用烘干法。取供試品2-5g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松樣品不超過10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100-105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移至干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5mg為止。根據減失的重量，計算供試品中含有水分的百分數。

操作步驟： 1. 標準曲線的繪制

精密量取對照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL，分別置試管中，加水至2 mL，再加6%苯酚溶液1 mL，混勻，迅速加入硫酸5mL，搖勻，置沸水浴中加熱15分鐘，立即冷卻，以相應試劑為空白，在490nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線。

2.供試品的測定

精密量取上述供試品溶液5mL，置50 mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取2mL, 置試管中，照標準曲線的制定項下的方法，自“加6%苯酚溶液1mL”起，依法測定吸收度。

參考文獻： 中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.397。