方法名稱： 多巴絲肼片—鹽酸左旋多巴和芐絲肼的測(cè)定—高效液相色譜法

應(yīng)用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測(cè)定多巴絲肼片中左旋多巴（C9H11NO4）和鹽酸芐絲肼（C10H15N3O5 ·HCl）的含量。

本方法適用于多巴絲肼片。

方法原理： 供試品制成水溶液，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)270nm 和220nm處檢測(cè)左旋多巴和鹽酸芐絲肼吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑： 1. 0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液

2. 甲醇

3. 乙腈

4. 0.005mol/L癸烷磺酸鈉溶液

5. 磷酸

儀器設(shè)備： 1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按芐絲肼峰計(jì)算應(yīng)不低于1000，左旋多巴峰與鹽酸芐絲肼峰的分離度應(yīng)符合要求。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液 甲醇 乙腈=70.5 25 4.5，制成0.005mol/L癸烷磺酸鈉溶液，并用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.5。

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：左旋多巴270nm，待左旋多巴出峰完全后檢測(cè)波長(zhǎng)改為220nm。

2.3 柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取本品適量（約相當(dāng)于左旋多巴100mg，芐絲肼28.5mg），置200mL量瓶中。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸絲肼與鹽酸三羥芐基芐絲肼對(duì)照品適量，分別加流動(dòng)相溶解并定量稀釋制成每1mL中含有0.285mg的溶液。

精密稱取左旋多巴對(duì)照品100mg與鹽酸芐絲肼對(duì)照品約28.5mg，置同一200mL量瓶中，加流動(dòng)相適量振搖使溶解，精密加入上述鹽酸絲肼溶液2mL與鹽酸三羥芐基芐絲肼溶液3mL，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即得混合對(duì)照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

將供試品流動(dòng)相180mL超聲處理2分鐘，振搖15分鐘，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

操作步驟： 分別精密吸取上述對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，先于波長(zhǎng)270nm處測(cè)定左旋多巴的吸收值，待左旋多巴出峰完全后檢測(cè)波長(zhǎng)改為220nm芐絲肼的吸收值，按外標(biāo)峰面積法計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)： 中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.51