生物體中有些化學成分在短波譜線照射下自發(fā)地激發(fā)熒光，叫自發(fā)熒光(Primaryfluorescence)。例如某些種類的維生素(A,B2)，生物色素，類脂質，彈力纖維等.自發(fā)熒光在顯微鏡下的顯色效應和顯像效應均很微弱，而且顯像時間也短。生物標本用熒光色素處理之后，在短波譜線照射下可以激發(fā)出輝煌的熒光，叫次發(fā)熒光，次發(fā)熒光的顯色效應和顯像效應極為強烈。因此它在熒光顯微鏡技術中占據(jù)最重要位置?，F(xiàn)今的熒光顯微鏡技術中合成更有效的熒光色素，開發(fā)更具特異性的標記技術，熒光色素與激發(fā)光波長間的變量關系，熒光強度的定量測定以及染色體分染熒光掃描分類等等都是重大探索的方向。