動物血采集后，立即分離出血清，此抗血清在保存或應(yīng)用前，必須作效價和特異性鑒定。

（一）雙向免疫擴(kuò)散法鑒定抗體的特異性

按雙向免疫擴(kuò)散技術(shù)打兩排孔，上排放抗原粗提物（如抗原來自動物血清則放相應(yīng)的混合血清）和純化抗原，下排加抗血清，進(jìn)行雙擴(kuò)散18～24h后，仔細(xì)觀察上下兩排孔之間出現(xiàn)的沉淀線。若與粗抗原及純抗原之間皆出現(xiàn)一條沉淀線醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理，且兩者互相融合，則證明該動物已產(chǎn)生單價特異性抗體；不出現(xiàn)沉淀線，表明示免疫成功。若與純化抗原出現(xiàn)一條，而與粗抗原出現(xiàn)多條線，且其中一條沉淀線與純抗原沉淀線相連接，也是成功的免疫，待取血后將雜抗體吸收去除，可以成為單價特異性抗體。

（二）雙向免疫擴(kuò)散法則定抗血清效價

測定抗血清效價有兩種稀釋方法：一是稀釋抗血清，如1/2、1/4、1/8、1/16對倍稀釋，分別與一個濃度的純抗原反應(yīng)；另一是稀釋抗原，即把抗原作對倍稀釋或按濃度（如mg/ml）進(jìn)行稀釋，分別與不同濃度的抗血清進(jìn)行雙擴(kuò)散試驗（稱為棋盤滴定），見表10-1.

表10-1抗血清效價測定

表中＋～＋＋＋代表出現(xiàn)沉淀線的濃度，如1：8抗體出現(xiàn)中等濃度沉淀線，與1：16、1：32則出現(xiàn)較弱的沉淀線。按表10-1的互為比例稀釋后確定抗血清的效價為1：32，最佳抗原濃度為1：16.效價在1：8以上即可采用于一般試驗醫(yī)學(xué)|教育網(wǎng)搜集整理。

（三）其他鑒定方法

有時，因抗原特殊，沉淀線不易出現(xiàn)，特別是制備的抗血清將用于某種試驗時，則考慮用其它方法（如血凝試驗、抑制試驗、中和試驗、放射免疫技術(shù)等）測定其效價。