青霉素適用于敏感細菌所致各種感染，如膿腫、菌血癥、肺炎和心內膜炎等。其中青霉素為以下感染的首選藥物： 1．溶血性鏈球菌感染，如咽炎、扁桃體炎、猩紅熱、丹毒、蜂窩織炎和產褥熱等。 2．肺炎鏈球菌感染如肺炎、中耳炎、腦膜炎和菌血癥等。 3．不產青霉素酶葡萄球菌感染。 4．炭疽。 5．破傷風、氣性壞疽等梭狀芽孢桿菌感染。 6．梅毒（包括先天性梅毒）。 7．鉤端螺旋體病。 8．回歸熱。 9．白喉。 10．青霉素與氨基糖苷類藥物聯(lián)合用于治療草綠色鏈球菌心內膜炎。

青霉素亦可用于治療： 1．流行性腦脊髓膜炎。 2．放線菌病。 3．淋病。 4．奮森咽峽炎。 5．萊姆病。 6．多殺巴斯德菌感染。 7．鼠咬熱。 8．李斯特菌感染。 9．除脆弱擬桿菌以外的許多厭氧菌感染。風濕性心臟病或先天性心臟病患者進行口腔、牙科、胃腸道或泌尿生殖道手術和操作前，可用青霉素預防感染性心內膜炎發(fā)生。