ELISA，即酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），是一種廣泛應用于臨床和科研領域的高靈敏度、特異性的免疫學檢測方法。其基本原理是利用抗原與抗體之間的特異性結合反應來檢測樣本中的目標分子。

ELISA試驗通常包括以下幾個步驟：
1. 包被：首先，將已知的抗原或抗體固定在固相載體（如微孔板）上，這個過程稱為包被。不同的ELISA類型會使用不同的物質(zhì)進行包被，例如直接法和間接法則分別以抗原和特異性抗體作為包被物。
2. 封閉：為了減少非特異性結合對結果的影響，在包被完成后需要加入含有高濃度無關蛋白質(zhì)的溶液（如牛血清白蛋白）來覆蓋未與目標分子結合的位點，這一過程稱為封閉。
3. 加樣：將待測樣本加入到已經(jīng)經(jīng)過包被和封閉處理的微孔板中。如果樣本中含有相應的抗原或抗體，則會發(fā)生特異性結合反應。
4. 洗滌：通過多次洗滌去除未結合的物質(zhì)，留下與固相載體上包被物發(fā)生特異性結合的目標分子。
5. 酶標二抗孵育：加入帶有酶標記的第二抗體（即酶標二抗）。此步驟中，酶標二抗會與樣本中的目標抗體或抗原形成復合體。不同類型的ELISA試驗在此步使用的酶標物質(zhì)可能有所不同。
6. 顯色反應：最后一步是向微孔板中加入底物溶液，如果存在酶標記的復合體，則會發(fā)生顏色變化。這種顏色的變化可以通過分光光度計等設備測量吸光度值來定量分析目標分子的濃度。

ELISA試驗因其操作簡便、靈敏度高、特異性強等特點，在臨床診斷、疾病篩查以及科學研究中得到了廣泛應用。