固相載體的要求和種類(lèi)都有什么呢？快來(lái)跟著小編了解一下吧！

除均相酶免疫測(cè)定外，各種非均相酶免疫測(cè)定反應(yīng)最后都需要分離游離和結(jié)合的酶標(biāo)記物。

固相抗體或抗原就是把抗體或抗原結(jié)合到固相載體的表面上，是酶免疫技術(shù)中將游離和結(jié)合的酶標(biāo)志物迅速分離的最常用方法。

（一）固相載體的要求　結(jié)合抗體或抗原的容量大；可將抗體或抗原牢固地固定在其表面，經(jīng)長(zhǎng)期保存和多次洗滌也不易脫落；不影響所固定的抗體或抗原的免疫反應(yīng)性，而且為使反應(yīng)充分進(jìn)行，最好其活性基團(tuán)朝向反應(yīng)溶液，固相方法簡(jiǎn)便易行，快速經(jīng)濟(jì)。

（二）固相載體的種類(lèi)和選擇

1.塑料制品：聚苯乙烯塑料最常采用?？乖蚩贵w以非共價(jià)或物理吸附方式結(jié)合到此載體上。

主要缺點(diǎn)是抗體（抗原）結(jié)合容量不高、固相抗體（抗原）脫吸附率較高且不均一，孔間變異大，重復(fù)性差，從而影響測(cè)定的靈敏度、精確度及檢測(cè)范圍。

目前采用非共價(jià)和化學(xué)偶聯(lián)共價(jià)吸附方法進(jìn)行抗原或抗體的固相化可改善上述缺點(diǎn)

2.微粒：易與抗體（抗原）形成化學(xué)偶聯(lián)，且結(jié)合容量大。均勻地分散到整個(gè)反應(yīng)溶液中，因此反應(yīng)速度快?？芍瞥纱呕㈩w粒。自動(dòng)化檢測(cè)中常用。

3.膜載體：常有硝酸纖維素膜（Nc）、玻璃纖維素膜及尼龍膜等通過(guò)非共價(jià)鍵吸附抗體（抗原），廣泛用于定性或半定量斑點(diǎn)ELISA的固相載體。

（三）包被與封閉

1.包被：將抗原或抗體結(jié)合在固相載體上的過(guò)程。普遍使用的聚苯乙烯載體，將抗原或抗體溶于緩沖液（常用為pH9.6的碳酸鹽緩沖液）中，加于ELISA板孔中4℃過(guò)夜。包被好的固相載體在低溫可放置一段時(shí)間而不失去免疫活性。

2.封閉：包被的蛋白質(zhì)濃度過(guò)低，固相載體表面不能被此蛋白質(zhì)完全覆蓋，其后加入的血清標(biāo)本和酶結(jié)合物中的蛋白質(zhì)也會(huì)部分地吸附于固相載體表面，最后產(chǎn)生非特異性顯色致本底偏高，在這種情況下，需用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清再包被一次，消除此干擾，此過(guò)程稱(chēng)為封閉。

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