常見膜載體免疫測(cè)定原理差異?
常見膜載體免疫測(cè)定主要有免疫滲濾試驗(yàn)、免疫層析試驗(yàn)等,它們?cè)谠砩洗嬖谝欢ú町悺?br/>
免疫滲濾試驗(yàn)的原理基于斑點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)。以雙抗體夾心法為例,先將特異性抗體固定在硝酸纖維素膜上形成固相載體。當(dāng)待檢標(biāo)本滴加在膜上時(shí),由于膜的毛細(xì)管作用,標(biāo)本會(huì)向四周滲透擴(kuò)散。標(biāo)本中的抗原會(huì)與膜上的抗體結(jié)合,形成抗原 - 抗體復(fù)合物。然后加入酶標(biāo)記的抗體,它會(huì)與已結(jié)合在膜上的抗原結(jié)合,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)記抗體復(fù)合物。最后加入底物,酶催化底物顯色,通過肉眼觀察顏色變化來判斷結(jié)果。其特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速,能在短時(shí)間內(nèi)得出結(jié)果,但靈敏度相對(duì)有限。
免疫層析試驗(yàn)則是利用了微孔膜的毛細(xì)管作用。同樣以雙抗體夾心法來說,在硝酸纖維素膜的特定區(qū)域分別包被檢測(cè)線(T線)的特異性抗體和質(zhì)控線(C線)的抗體。樣品滴加在樣品墊上后,會(huì)沿著膜向前移動(dòng)。如果樣品中存在抗原,抗原會(huì)與結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合,形成抗原 - 膠體金標(biāo)記抗體復(fù)合物。當(dāng)復(fù)合物移動(dòng)到檢測(cè)線時(shí),會(huì)被T線的抗體捕獲,形成雙抗體夾心結(jié)構(gòu),出現(xiàn)肉眼可見的紅色條帶。未結(jié)合的膠體金標(biāo)記抗體繼續(xù)移動(dòng)到質(zhì)控線,與C線抗體結(jié)合顯色,作為實(shí)驗(yàn)有效的標(biāo)志。免疫層析試驗(yàn)操作更為簡(jiǎn)單、快速,可單人份檢測(cè),適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè),但定量檢測(cè)能力較差。
總之,不同的膜載體免疫測(cè)定原理各有特點(diǎn),在靈敏度、操作便捷性、檢測(cè)速度、定量能力等方面存在差異,可根據(jù)實(shí)際需求選擇合適的檢測(cè)方法。
免疫滲濾試驗(yàn)的原理基于斑點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)。以雙抗體夾心法為例,先將特異性抗體固定在硝酸纖維素膜上形成固相載體。當(dāng)待檢標(biāo)本滴加在膜上時(shí),由于膜的毛細(xì)管作用,標(biāo)本會(huì)向四周滲透擴(kuò)散。標(biāo)本中的抗原會(huì)與膜上的抗體結(jié)合,形成抗原 - 抗體復(fù)合物。然后加入酶標(biāo)記的抗體,它會(huì)與已結(jié)合在膜上的抗原結(jié)合,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)記抗體復(fù)合物。最后加入底物,酶催化底物顯色,通過肉眼觀察顏色變化來判斷結(jié)果。其特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速,能在短時(shí)間內(nèi)得出結(jié)果,但靈敏度相對(duì)有限。
免疫層析試驗(yàn)則是利用了微孔膜的毛細(xì)管作用。同樣以雙抗體夾心法來說,在硝酸纖維素膜的特定區(qū)域分別包被檢測(cè)線(T線)的特異性抗體和質(zhì)控線(C線)的抗體。樣品滴加在樣品墊上后,會(huì)沿著膜向前移動(dòng)。如果樣品中存在抗原,抗原會(huì)與結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合,形成抗原 - 膠體金標(biāo)記抗體復(fù)合物。當(dāng)復(fù)合物移動(dòng)到檢測(cè)線時(shí),會(huì)被T線的抗體捕獲,形成雙抗體夾心結(jié)構(gòu),出現(xiàn)肉眼可見的紅色條帶。未結(jié)合的膠體金標(biāo)記抗體繼續(xù)移動(dòng)到質(zhì)控線,與C線抗體結(jié)合顯色,作為實(shí)驗(yàn)有效的標(biāo)志。免疫層析試驗(yàn)操作更為簡(jiǎn)單、快速,可單人份檢測(cè),適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè),但定量檢測(cè)能力較差。
總之,不同的膜載體免疫測(cè)定原理各有特點(diǎn),在靈敏度、操作便捷性、檢測(cè)速度、定量能力等方面存在差異,可根據(jù)實(shí)際需求選擇合適的檢測(cè)方法。

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