免疫原制備是免疫學(xué)研究和相關(guān)檢測(cè)技術(shù)的基礎(chǔ)，以下介紹幾種常見(jiàn)的免疫原制備方法。

對(duì)于蛋白質(zhì)抗原的制備，最常用的是組織和細(xì)胞抗原的制備。首先要將組織或細(xì)胞破碎，對(duì)于質(zhì)地堅(jiān)硬的組織，可采用研磨法，將組織剪碎后在研缽中研磨成勻漿；也可使用組織勻漿器，通過(guò)高速旋轉(zhuǎn)的刀片將組織細(xì)胞破碎。破碎后的細(xì)胞懸液可采用反復(fù)凍融法，利用細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成和融化使細(xì)胞膜破裂，釋放出抗原。之后，通過(guò)低速離心去除組織殘?jiān)?，再用高速離心或超濾等方法進(jìn)一步分離和純化抗原。對(duì)于細(xì)菌等微生物抗原，可采用物理方法如超聲波破碎，利用超聲波的空化效應(yīng)破壞細(xì)菌細(xì)胞壁；也可用化學(xué)方法，如用酚、氯仿等試劑處理，使細(xì)菌裂解。得到的抗原粗提物還需經(jīng)過(guò)離子交換層析、親和層析等方法進(jìn)行純化。

對(duì)于多肽抗原的制備，化學(xué)合成法是常用手段。依據(jù)已知的氨基酸序列，通過(guò)逐步合成的方式將氨基酸連接成多肽。這種方法可以精確控制多肽的長(zhǎng)度和氨基酸組成，但合成的多肽分子量較小，免疫原性弱，通常需要與載體蛋白如牛血清白蛋白、鑰孔戚血藍(lán)蛋白等進(jìn)行偶聯(lián)，以增強(qiáng)其免疫原性。偶聯(lián)方法有戊二醛法、碳化二亞胺法等，戊二醛能使多肽和載體蛋白上的氨基通過(guò)共價(jià)鍵連接起來(lái)；碳化二亞胺則可促進(jìn)羧基和氨基之間形成肽鍵。

多糖抗原的制備，一般先從含有多糖的生物材料中提取，可采用水提醇沉法，利用多糖在水中溶解、在高濃度乙醇中沉淀的特性進(jìn)行提取。提取后的多糖還需去除雜質(zhì)，如蛋白質(zhì)、核酸等，可采用 Sevag 法去除蛋白質(zhì)，通過(guò)氯仿 - 正丁醇混合液使蛋白質(zhì)變性沉淀。經(jīng)過(guò)這些處理后，多糖抗原還可進(jìn)行分級(jí)純化，如凝膠過(guò)濾層析等，以獲得純度較高的多糖免疫原。

此外，基因工程制備免疫原近年來(lái)也得到廣泛應(yīng)用。先從生物體中獲取編碼目的抗原的基因，將其克隆到合適的表達(dá)載體上，然后導(dǎo)入宿主細(xì)胞如大腸桿菌、酵母細(xì)胞等進(jìn)行表達(dá)。表達(dá)后的抗原需要進(jìn)行分離和純化，根據(jù)抗原的特性選擇合適的純化方法