雜交瘤細胞篩選過程中,常用的選擇性培養(yǎng)基是什么?
在雜交瘤細胞篩選過程中,常用的選擇性培養(yǎng)基是HAT培養(yǎng)基。HAT培養(yǎng)基是在基礎培養(yǎng)基中添加了次黃嘌呤(Hypoxanthine)、氨基蝶呤(Aminopterin)和胸腺嘧啶核苷(Thymidine)三種成分。這種培養(yǎng)基的作用機制是:氨基蝶呤能夠抑制二氫葉酸還原酶的活性,從而阻止細胞從頭合成DNA的過程;而次黃嘌呤和胸腺嘧啶則為細胞提供了一條補救途徑,即通過利用這些外源性核苷酸來維持DNA的合成。正常小鼠脾細胞因無法長期依賴此補救途徑生存而逐漸死亡,但融合后的雜交瘤細胞由于攜帶了骨髓瘤細胞的二氫葉酸還原酶基因缺陷以外的所有遺傳信息,可以無限增殖并分泌單克隆抗體。因此,在HAT培養(yǎng)基中只有成功融合的雜交瘤細胞才能存活下來,并被篩選出來用于后續(xù)實驗。

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