如何通過(guò)生化試驗(yàn)鑒定志賀菌屬?
在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中,通過(guò)生化試驗(yàn)鑒定志賀菌屬是一項(xiàng)重要的技能。志賀菌屬是一類革蘭氏陰性桿菌,能夠引起人類細(xì)菌性痢疾。以下是常用的幾種生化試驗(yàn)方法來(lái)幫助鑒定志賀菌:
1. 動(dòng)力觀察:志賀菌是無(wú)鞭毛的非運(yùn)動(dòng)菌,可以在半固體培養(yǎng)基上進(jìn)行動(dòng)力測(cè)試以確認(rèn)此特征。
2. 乳糖發(fā)酵試驗(yàn):將疑似菌株接種到乳糖發(fā)酵管中,在37攝氏度下孵育24小時(shí)。志賀菌不發(fā)酵乳糖,因此不會(huì)產(chǎn)酸產(chǎn)氣,而對(duì)照的陽(yáng)性對(duì)照(如大腸埃希菌)則會(huì)產(chǎn)酸產(chǎn)氣。
3. 葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn):雖然志賀菌不能發(fā)酵乳糖,但它們可以分解葡萄糖產(chǎn)生酸而不產(chǎn)氣。通過(guò)使用含有酚紅指示劑的葡萄糖發(fā)酵管來(lái)檢測(cè)這一特性。
4. 尿素酶試驗(yàn):將細(xì)菌接種到含尿素的培養(yǎng)基中并孵育24-48小時(shí)。志賀菌屬成員陰性,即不能分解尿素產(chǎn)生氨,而某些其他腸道桿菌如變形桿菌則為陽(yáng)性反應(yīng)。
5. 甲基紅和V-P(Voges-Proskauer)試驗(yàn):這兩個(gè)測(cè)試用于評(píng)估細(xì)菌代謝產(chǎn)物的性質(zhì)。志賀菌在甲基紅試驗(yàn)中通常呈陽(yáng)性(紅色),表明其能夠產(chǎn)生足夠的酸來(lái)降低培養(yǎng)基pH值;而在V-P試驗(yàn)中則為陰性(無(wú)顏色變化或淡黃色),說(shuō)明它不積累大量乙醇酸。
6. 靛基質(zhì)試驗(yàn):此測(cè)試用于檢測(cè)細(xì)菌是否能分解色氨酸生成靛基質(zhì)。志賀菌屬成員通常為陰性反應(yīng),即不會(huì)有紅色出現(xiàn)。
7. 硫化氫產(chǎn)生試驗(yàn):通過(guò)觀察三糖鐵(TSI)斜面或含鐵離子的培養(yǎng)基中是否有黑色沉淀來(lái)判斷硫化氫的產(chǎn)生情況。志賀菌不產(chǎn)H2S,故在這些測(cè)試中應(yīng)為陰性結(jié)果。
8. 動(dòng)力-吲哚-尿素(MIU)試驗(yàn):這是一個(gè)組合實(shí)驗(yàn),可以同時(shí)評(píng)估細(xì)菌的動(dòng)力、吲哚生成能力和尿素酶活性。對(duì)于志賀菌來(lái)說(shuō),預(yù)期的結(jié)果是無(wú)動(dòng)力、不產(chǎn)生吲哚和不能分解尿素。
通過(guò)上述一系列生化反應(yīng)的
1. 動(dòng)力觀察:志賀菌是無(wú)鞭毛的非運(yùn)動(dòng)菌,可以在半固體培養(yǎng)基上進(jìn)行動(dòng)力測(cè)試以確認(rèn)此特征。
2. 乳糖發(fā)酵試驗(yàn):將疑似菌株接種到乳糖發(fā)酵管中,在37攝氏度下孵育24小時(shí)。志賀菌不發(fā)酵乳糖,因此不會(huì)產(chǎn)酸產(chǎn)氣,而對(duì)照的陽(yáng)性對(duì)照(如大腸埃希菌)則會(huì)產(chǎn)酸產(chǎn)氣。
3. 葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn):雖然志賀菌不能發(fā)酵乳糖,但它們可以分解葡萄糖產(chǎn)生酸而不產(chǎn)氣。通過(guò)使用含有酚紅指示劑的葡萄糖發(fā)酵管來(lái)檢測(cè)這一特性。
4. 尿素酶試驗(yàn):將細(xì)菌接種到含尿素的培養(yǎng)基中并孵育24-48小時(shí)。志賀菌屬成員陰性,即不能分解尿素產(chǎn)生氨,而某些其他腸道桿菌如變形桿菌則為陽(yáng)性反應(yīng)。
5. 甲基紅和V-P(Voges-Proskauer)試驗(yàn):這兩個(gè)測(cè)試用于評(píng)估細(xì)菌代謝產(chǎn)物的性質(zhì)。志賀菌在甲基紅試驗(yàn)中通常呈陽(yáng)性(紅色),表明其能夠產(chǎn)生足夠的酸來(lái)降低培養(yǎng)基pH值;而在V-P試驗(yàn)中則為陰性(無(wú)顏色變化或淡黃色),說(shuō)明它不積累大量乙醇酸。
6. 靛基質(zhì)試驗(yàn):此測(cè)試用于檢測(cè)細(xì)菌是否能分解色氨酸生成靛基質(zhì)。志賀菌屬成員通常為陰性反應(yīng),即不會(huì)有紅色出現(xiàn)。
7. 硫化氫產(chǎn)生試驗(yàn):通過(guò)觀察三糖鐵(TSI)斜面或含鐵離子的培養(yǎng)基中是否有黑色沉淀來(lái)判斷硫化氫的產(chǎn)生情況。志賀菌不產(chǎn)H2S,故在這些測(cè)試中應(yīng)為陰性結(jié)果。
8. 動(dòng)力-吲哚-尿素(MIU)試驗(yàn):這是一個(gè)組合實(shí)驗(yàn),可以同時(shí)評(píng)估細(xì)菌的動(dòng)力、吲哚生成能力和尿素酶活性。對(duì)于志賀菌來(lái)說(shuō),預(yù)期的結(jié)果是無(wú)動(dòng)力、不產(chǎn)生吲哚和不能分解尿素。
通過(guò)上述一系列生化反應(yīng)的

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