雜交瘤技術是制備單克隆抗體的重要方法之一。這項技術的基本原理是將一種能夠產生特異性抗體的B淋巴細胞（通常從免疫過的小鼠脾臟中獲得）與另一種具有永生化能力的骨髓瘤細胞進行融合，形成雜交瘤細胞。這種雜交瘤細胞既保留了B淋巴細胞分泌特定抗體的能力，又獲得了骨髓瘤細胞無限增殖的特點。

具體步驟如下：
1. 免疫小鼠：首先選擇適合的小鼠品系，用目標抗原免疫小鼠，使體內產生針對該抗原的特異性B淋巴細胞。
2. 脾細胞與骨髓瘤細胞融合：取免疫后小鼠脾臟中的B淋巴細胞，并將其與預先準備好的骨髓瘤細胞按照一定比例混合，在促融劑（如聚乙二醇PEG）的作用下進行細胞融合，形成雜交瘤細胞。
3. 選擇性培養(yǎng)基篩選：將上述融合產物接種于HAT選擇性培養(yǎng)基中，只有成功融合的雜交瘤細胞能夠存活并生長。未融合或自相融合的骨髓瘤細胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶（HGPRT）而無法在該培養(yǎng)基上生存。
4. 克隆化篩選：通過有限稀釋法等方法對陽性雜交瘤進行克隆化，挑選出能穩(wěn)定分泌所需特異性單抗的單一細胞系。
5. 擴增與保存：將篩選得到的優(yōu)質雜交瘤細胞株在體外大規(guī)模培養(yǎng)或體內注射到小鼠腹腔內大量生產單抗，并可長期凍存?zhèn)溆谩?br/>
通過上述過程制備出來的單克隆抗體具有高度均一性和特異性，廣泛應用于科研、診斷試劑開發(fā)以及臨床治療等領域。