競爭法免疫測定原理是什么?
競爭法免疫測定是一種常用的免疫學(xué)檢測方法,主要用于檢測樣本中特定抗原的存在和濃度。其基本原理是利用了抗原與抗體之間特異性的結(jié)合反應(yīng)。在競爭法免疫測定中,待測的未知抗原與已知的標記抗原(通常用酶、熒光素或放射性同位素等進行標記)競爭有限數(shù)量的特異性抗體結(jié)合位點。
具體過程如下:首先將樣本中的未知抗原和一定量的標記抗原同時加入含有固定量特異性抗體的反應(yīng)體系中。由于抗體量是固定的,當樣本中待測抗原濃度較高時,它就會與更多的抗體結(jié)合,導(dǎo)致能夠與抗體結(jié)合的標記抗原數(shù)量減少;反之,如果樣本中待測抗原濃度較低,則會有更多標記抗原與抗體結(jié)合。
通過檢測反應(yīng)后剩余未結(jié)合或已結(jié)合的標記物量的變化(如酶促反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化、熒光強度的變化等),可以間接反映出樣本中目標抗原的實際含量。根據(jù)標準曲線,最終確定未知樣品中的抗原濃度。
這種測定方法廣泛應(yīng)用于臨床檢驗中各種疾病的診斷和治療監(jiān)測,例如藥物濫用篩查、病毒抗體檢測等領(lǐng)域。
具體過程如下:首先將樣本中的未知抗原和一定量的標記抗原同時加入含有固定量特異性抗體的反應(yīng)體系中。由于抗體量是固定的,當樣本中待測抗原濃度較高時,它就會與更多的抗體結(jié)合,導(dǎo)致能夠與抗體結(jié)合的標記抗原數(shù)量減少;反之,如果樣本中待測抗原濃度較低,則會有更多標記抗原與抗體結(jié)合。
通過檢測反應(yīng)后剩余未結(jié)合或已結(jié)合的標記物量的變化(如酶促反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化、熒光強度的變化等),可以間接反映出樣本中目標抗原的實際含量。根據(jù)標準曲線,最終確定未知樣品中的抗原濃度。
這種測定方法廣泛應(yīng)用于臨床檢驗中各種疾病的診斷和治療監(jiān)測,例如藥物濫用篩查、病毒抗體檢測等領(lǐng)域。

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