ELISA，即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay），是一種用于檢測(cè)特定抗原或抗體存在的高靈敏度和特異性的免疫學(xué)方法。其基本原理是利用固相載體上的抗原或抗體來(lái)捕獲待測(cè)樣本中的相應(yīng)成分，并通過(guò)一系列的結(jié)合反應(yīng)，最終借助酶促底物顯色反應(yīng)來(lái)定性或定量地測(cè)定目標(biāo)物質(zhì)。

ELISA技術(shù)主要分為直接法、間接法、夾心法（雙抗體夾心法）、競(jìng)爭(zhēng)法等幾種類(lèi)型。下面簡(jiǎn)要介紹這四種方法的基本原理：
1. 直接法：將已知的抗原固定在固相載體上，加入待測(cè)樣本中的特異性抗體使其與固定的抗原結(jié)合，再加酶標(biāo)記的第二抗體識(shí)別并結(jié)合到第一抗體上形成復(fù)合物。最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)判斷是否存在目標(biāo)物質(zhì)。
2. 間接法：首先將已知的抗原固定在固相載體表面，然后加入待測(cè)樣本中的特異性抗體使其與固定的抗原相結(jié)合。之后再用酶標(biāo)記的第二抗體（針對(duì)第一抗體）進(jìn)行識(shí)別和結(jié)合。最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)。
3. 夾心法：此方法適用于檢測(cè)大分子量的目標(biāo)蛋白。首先將一種特定的捕捉抗體固定在固相載體上，然后加入待測(cè)樣本中的目標(biāo)抗原使其與固定的抗體相結(jié)合。隨后再加入另一種針對(duì)該抗原不同表位的酶標(biāo)記抗體形成“夾心”結(jié)構(gòu)。最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)檢測(cè)目標(biāo)物質(zhì)。
4. 競(jìng)爭(zhēng)法：將已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌泛痛郎y(cè)樣本同時(shí)加入含有固定化抗原（或抗體）的孔中，二者競(jìng)爭(zhēng)性地與固相載體上的位點(diǎn)結(jié)合。由于標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌返牧渴枪潭ǖ模虼丝梢酝ㄟ^(guò)比較它們之間結(jié)合程度的變化來(lái)推算出待測(cè)樣本中的目標(biāo)物質(zhì)濃度。

ELISA技術(shù)因其操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，在臨床診斷、科學(xué)研究等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。