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外周血淋巴細(xì)胞HLA-B27表達(dá)檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)步驟

2009-01-16 19:12 來(lái)源：
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　　1、標(biāo)本采集：使用EDTA-K2抗凝真空采血管，抽取靜脈血2ml。

　　2、染色和固定細(xì)胞：

　?。?）標(biāo)本管編號(hào)A，取一只流式專(zhuān)用管A1。

　　（2）A1管加入Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 30ul。

　?。?）A1管中再加入全血50Ul，混均。

　?。?）置室溫，避光孵育15min。

　?。?）加入FACSLysing溶血液2.0ml，置室溫，避光孵育10min。

　?。?）300g離心5min，棄上清液。

　　（7）PBS洗滌細(xì)胞兩次，300g離心5min，棄上清液。

　　（8）1%多聚甲醛0.5mL。

　　 3、上機(jī)檢測(cè)；分析結(jié)果；打印實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

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