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細胞因子及其受體應該如何檢測?

2019-03-08 17:04 來源:
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細胞因子在機體免疫應答過程中起著十分重要的作用。在某些疾病時,體內細胞因子及其受體表達可發(fā)生異常,與機體免疫功能低下或發(fā)生病理損傷有關。因此,在臨床免疫學中越來越重視對細胞因子及其受體的檢測。在基礎免疫研究中,常需檢測不同條件培養(yǎng)液中細胞因子的活性,并探討細胞因子產生水平與免疫細胞表型、增殖、殺傷及其它功能的關系。此外,原核細胞和真核細胞中表達的重組細胞因子或經過不同工藝純化后的產品需測定其活性和含量。

從細胞因子及其受體檢測的水平來說,可以分為 基因組 DNA、mRNA和蛋白三個不同的水平,后者又包括胞漿內、膜表面以及分泌到體液或培養(yǎng)上清等三種不同形式細胞因子。目前應用最多的是檢測體液或培養(yǎng)豐清中的細胞因子以及膜表面的細胞因子受體。

這里簡單介紹一下生物活性檢測法

細胞因子生物學活性檢測法是根據某些細胞因子特定的生物學活性,應用相應的指示系統(tǒng)和標準品來反映待測標本中某種細胞因子的活性水平,一般以活性單位來表示。生物學檢測法一般敏感性較高,直接表示待測標本中的活性水平。但實驗周期較長,如集落形成法需10~14;易受 細胞培養(yǎng) 中某些因素的影響,如血清、pH、藥物;易受生物學活性相同或相近的其它細胞因子的影響,如檢測IL-2時可受IL-4的干擾,TNF-α和TNF-β(淋巴毒素)表現(xiàn)出極為相似的生物學作用;易受待栓樣品中某些細胞因子抑制物的干擾,如IL-1活性可被IL-1受體拮抗物(IL-1ra)所抑制,TNF-α可被TNF-BP所阻斷;不能區(qū)分某些細胞因子的型和亞型,如IFN-α、β和γ,以及IFN-α中不同的亞型顯示相同的生物學活性;某些指示細胞長期培養(yǎng)易發(fā)生突變;不同指示細胞對同一種細胞因子的敏感性不同,所慕名而來結果難于標準化;此外,某些人源的細胞因子如hIL-2對小鼠細胞起作用,但鼠源性的IL-2對人的細胞則無刺激作用。

生物學檢測的方法大致可分為增殖或增殖抑制、集落形成、直接殺傷靶細胞、保護靶細胞免受病毒攻擊、趨化作用以及抗體形成法等幾類。

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